1.目的：规范Agilent 1260高效液相色谱仪维修、保养、校正操作。
2.适用范围：本公司化验室Agilent 1260高效液相色谱仪的维修、保养。
3.有关责任：化验室精密仪器室
4.引用标准：仪器说明书及Agilent化学工作者现场操作培训教材
5.规程内容：
5.1开机前准备
5.1.1根据实验要求配制流动相，须经0.45μm滤膜过滤，之后再进行脱气处理，使用前必须用超声波振荡l0-15min，按无机相和有机相分开别装入溶剂瓶A（装有洗盐装置，最好固定盛放无机盐水相）、B中；对照品和样品溶液进样前要经0.45μm滤膜过滤。
5.1.2若流动相中含有缓冲盐,则必须以每分钟2～3滴的速度虹吸10%的异丙醇水冲洗seal-wash，以防有盐结晶在泵头产生而损坏泵头。
5.2.采样前准备
5.2.1打开计算机,进入 Windows 系统, 从上到下依次打开各模块电源。
5.2.2待各模块自检完成后，双击桌面上的“仪器1联机”图标，将自动进入化学工作站画面。
5.2.3从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面,也可单击工作站画面左侧的“方法和运行控制”项，进入方法和运行控制窗口。
5.2.4打开Purge阀（逆时针），右击“泵”图标出现参数设定菜单单击“设定泵”选项进入泵编辑画面。
5.2.5设“流量”逐步增大流速至5ml/min ，A通道设到100%，单击“确
定”。
5.2.6单击“泵”图标，出现参数设定菜单，单击“泵控制“选项选中“开”单击“确定”则系统开始Purge，直到管路内由溶剂瓶A到泵入口无气泡为止；切换B通道(B通道设到100%)继续Purge直到所有通道管路内均无气泡为止。(查看柱前压力，若大于10Bar，则应更换排气阀内滤芯/过滤白头。)
5.2.7将泵的流量设到0.5ml/min，若使用双泵则应设定溶剂配比，如A=80%，B=20%；关闭排气阀（顺时针）；再将流量设到0.8ml/min，2分钟后设定至方法所需流速，冲洗色谱柱20-30min。
5.2.8单击泵下面的瓶图标，输入溶剂瓶A、B内流动相的实际体积（为保护泵和色谱柱，请按实际体积输入）和停泵的体积单击“确定”，如果各溶剂瓶溶剂体积小于停泵体积，泵将自动停止。
5.2.9把缓冲液（用于柱子过渡的，与流动相等比例的乙腈/水、甲醇/水或10%的水溶液）换成流动相，排气后，逐步增加至所需流速，待柱压基本稳定后，打开检测器等，观察基线情况。
5.3.数据采集
5.3.1采集方法编辑
5.3.1.1编辑完整方法：从“方法”菜单中选择“编辑完整方法”项，选中除“数据分析”外的三项，单击“确定”进入下一画面。
5.3.1.2方法信息：在“方法注释”栏中加入（如方法的用途等），单击“确定”进入下一画面。
5.3.1.3泵参数设定：在“流速”处输入方法所需流量（如1ml/min）；默认
为A为100%，如需二元高压，在“溶剂B”处输入所需比例,则溶剂A=100-B ，也可“插入”一行“时间表”编辑二元梯度；在“压力限”处输入柱子的最大耐高压（建议设定200bar）以保护柱子 ,单击“确定”进入下一画面 。
5.3.1.4 VWD检测器参数设定：在“波长”下方的空白处输入所需的检测波长，如254nm；在“峰宽(响应时间)”下方点击下拉式三角框,选择合适的响应时间（如>0.1min (2s)）；如有特殊要求，也可在“时间表”中可以“插入”一行输入随时间切换的波长（如1min 波长=300nm），点击“确定”。
5.3.1.5在“运行时选项表”中选中“数据采集”选项，单击“确定”。
5.3.1.6单击“方法”菜单选中“方法另存为”输入方法名，单击“确定”。
5.3.1.7从“视图”菜单中选中“在线信号”,选中“信号窗口1”,然后单击“改变”钮,将所要查看的信号移到右边框中,单击“确定”。
5.3.1.8进样器参数设定：在进样模式中输入“进样量”xxμl，默认为20μl。“标准进针”只能输入进样体积，此方式无洗针功能。“针清洗后进样”可以输入进样体积和洗瓶位置为xx，此方式针从样品瓶抽完样品后会在洗瓶中洗针。
进样器进样程序参数设定：选中使用进样程序，在“函数”中添加相应函 数即可按程序进样。
5.3.1.9 TCC检测器参数设定：在“温度”左侧下面的方框内输入所需温度，并选中它，右侧选中“与左侧相同”——使柱温箱的温度左右一致。
5.3.2运行方法
5.3.2.1单针进样
5.3.2.1.1选择“单针进样”图标。
5.3.2.1.2从“运行控制”菜单中选择“样品信息”选项，输入“操作者名称”，数据存储目录路径中的子目录，子目录即为数据图谱存储的文件夹，输入后，鼠标点击其他地方，会自动弹出“E：\——不存在，要创建它吗？”单击“确定”。“数据文件”中选择“手动”或“前缀/计数器”。（区别:“手动”--每次做样之前必须给出新名字,否则仪器会将上次的数据覆盖掉；“前缀/计数器”在“前缀”框中输入前缀，如20120505,在“计数器” 框中输入计数器的起始位,仪器会自动命名如20120505000001、20120505000002等等。）“样品位置”填写进样瓶的位置。
5.3.2.1.3点击画面中的“开始”运行方法，中间停止采样点“结束”。
5.3.2.2 序列进样
5.3.2.2.1“序列”下“序列参数”，设置同单针进样，样品位置不填。
5.3.2.2.2“序列”下选择“序列表”，在表格中可进行“插入”、“剪切”“复制”“粘贴”“追加行”等操作，表格中必须填写“样品瓶”“样品名称”“方法名称”“进样次数”“数据文件”“进样量”等信息，其他信息可选择编辑。编辑完成后，单击“确定”。在“序列菜单中选择“序列模板另存为”为新建序列命名。
5.3.2.2.3在“仪器”菜单中选择“运行序列”运行当前序列。停止采集数据选择“仪器”菜单中“停止运行/进样/序列”。或者同单针进样的方法。
5.4.数据分析方法编辑
5.4.1 从“视图”菜单中单击“数据分析”进入数据分析画面。
5.4.2从“文件”菜单选择“调用信号”选中所做的数据文件，单击“确定”，也可直接双击打开。
5.4.3做谱图优化：从“图形”菜单中选择“信号选项”，再从“范围”中选择“自动量程”及合适的显示时间单击“确定”或选择“自定义量程”调整,反复进行直到图的比例合适为止。
5.4.4积分优化
5.4.4.1从“积分”中选择“自动积分”, 若积分结果不理想,再从菜单中选“积分事件”选项，选择合适的“斜率灵敏度”、“峰宽”、“最小峰面积”、“最小峰高”。
5.4.4.2从“积分”菜单中选择“积分”选项，则数据被积分。
5.4.4.3如积分结果还不理想，则修改相应的积分参数直到满意为止。
5.4.4.4单击左边“保存并退出”图标将积分参数存入当前方法中。
5.5打印报告
5.5.1从“报告”菜单中选择“设定报告”选项。
5.5.2单击“定量结果”框中“定量”右侧的黑三角选中所采用的报告方法（如面积外标法等），单击“确定”。
5.5.3从“报告”菜单中选择“打印”则报告打印结果将显示在屏幕上，如想输出到打印机，则单击“报告”底部的“打印”钮即可。
5.6关机
5.6.1关机前，用95%水冲洗柱子和系统0.5-1小时，流量0.5-l.0ml/min，再用100%有机溶剂冲0.5小时，然后关闭系统。
包含各类专业文献、生活休闲娱乐、各类资格考试、行业资料、外语学习资料、应用写作文书、文学作品欣赏、中学教育、94安捷伦1260型高效液相色谱仪详细操作规程等内容
5.6.2退出化学工作站，及其它窗口，关闭计算机（用shutdown关）。
5.6.3关掉主机电源开关。
5.7注意事项：
5.7.1氘灯是易耗品，应最后开灯，不分析样品即关灯。
5.7.2 流动相不要使用多日存放的蒸馏水（易长菌）。
5.7.3流速突然突然变大或变小会导致柱压的突然改变，时间久了柱子填料会坍陷或松动，最终柱压下降，所以泵开始和结束前要注意缓慢改变流速。
